上海安譜HPLC色譜純?nèi)軇?br /> 高效液相色譜流動(dòng)相的選擇及注意事項(xiàng)如下:
1、流動(dòng)相的性質(zhì)要求。一個(gè)理想的流動(dòng)相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。選好填料(固定相)后，強(qiáng)溶劑使溶質(zhì)在填料表面的吸附減少，相應(yīng)的容量因子k降低;而蛟弱的溶劑使溶質(zhì)在填料表面吸附增加，相應(yīng)的容量因子k升高。理論塔板數(shù)N一般與流動(dòng)相的粘度成反比。所以選擇流動(dòng)相時(shí)應(yīng)從以下幾個(gè)方面考慮∶@流動(dòng)相不得改變填料的任何性質(zhì)。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時(shí)遇到某些有機(jī)相會(huì)溶脹或收縮，從而改變色諾柱填床的性質(zhì)。流動(dòng)相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性流動(dòng)相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。②純度。色諾柱的壽命與流動(dòng)相有較大的關(guān)系，特別是其所含雜質(zhì)在柱上有大量沉積的溶劑。③與檢測圈匹配。使用紫外檢測器時(shí)，所用流動(dòng)相在檢測波長下不得有吸收，或吸收很小。④粘度要低。高粘度溶劑會(huì)影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì)，降低柱效，還會(huì)使柱壓增加，分離時(shí)間延長。選擇沸點(diǎn)在100C以下的流動(dòng)相。
2、流動(dòng)相的pH值。采用反相色譜法分離弱酸樣品時(shí)，通過調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值，以抑制樣品組分的解離，增加組分在固定相上的保留，并改善峰形的技術(shù)稱為反相離子抑制技術(shù)。對于弱酸，流動(dòng)相的pH值越小，組分的k值越大，當(dāng)pH值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于弱酸的pKa值時(shí)，弱酸主要以分子形式存在。分析弱酸樣品時(shí)，通常在流動(dòng)相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%酣酸溶液;分析樣品時(shí)，通常在流動(dòng)相中加入少量。
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